相関性　-　検量線　-　RNA共存の影響　-　検出系           Competitive NASBA     原理       既知濃度のQA（内部標準物質）を同時に増幅することで、コピー数未知の検体中のRNA量が定量可能です。QAは、WTの配列の一部を変更したcompetitorです。           ページの一番上へ           相関性（Relative RT-PCR法／Competitive NASBA法）         MDR-1遺伝子の発現量をCompetitive NASBAとRelative RT-PCRで測定しました。 Relative RT-PCRは、House Keeping Geneである、β2-ミクログロビン遺伝子の発現量を1.0とし、MDR-1遺伝子の発現量を示しました。               ページの一番上へ           検量線（Competitive NASBA法）           Competitive NASBAでの検量線を示しました。WTが102 copies～107 copiesまで良好な直線性が得られました。 増幅・検出には、Sandwich hybridization法を原理としたHybrigeneを用いました。               ページの一番上へ           RNA共存の影響（定量NASBA）           共存RNAの影響を調べるため、健常人から抽出したTotal RNA1μg（ターゲットとなるMDR-1発現レベル:0）を添加し増幅・検出を行いました。 10copiesから106copiesまで共存RNAの影響は認められませんでした。               ページの一番上へ                       コスモアイ       Dot Blotting                     ページの一番上へ