アニメーション内容の詳細へ             このページをご覧になるには、Netscape Navigator3.0以上または Microsoft Internet Explorer3.0以上のブウラザーと SHOCKWAVEのプラグインが必要です。             NASBA初期工程　-　NASBA増幅工程　-　ページの一番上へ     NASBA初期工程     (1) 鋳型となるRNAに、プライマー1（P1）が結合します。 P1の5'末端には、T7 RNA polymeraseのプロモーター配列が付加されています。           (2) AMV Reverse Transcriptase（AMV-RT）によってcDNAが合成されます。           (3) RNA-DNA（2本鎖）ハイブリッドになりました。           (4) RNase Hによって、RNA-DNA（2本鎖）ハイブリッドのRNA鎖だけが分解され、1本鎖cDNAになります。           (5) cDNAに、プライマー2(P2)が結合します。           (6) AMV-RTのDNA polymerase 活性によって、プロモーター配列の付加された2本鎖cDNAが合成されます。     NASBA初期工程　-　NASBA増幅工程　-　ページの一番上へ     NASBA増幅工程     (7) 2本鎖のプロモーター配列をT7 RNA polymeraseが認識して、P2の5'末端までT7 RNA polymeraseによる転写反応で、1本鎖のアンチセンスRNAが多数合成されます。           (8) (7)の工程で合成された1本鎖のアンチセンスRNAに、P2が結合します。           (9) AMV-RTによってcDNAが合成されます。           (10) RNA-DNA（2本鎖）ハイブリッドになりました。           (11) RNase Hによって、RNA-DNA（2本鎖）ハイブリッドのRNA鎖だけが分解され、1本鎖cDNAになります。           (12) cDNAに、P1が結合します。           (13) AMV-RTのDNA polymerase 活性によって、プロモーター配列の付加された2本鎖cDNAが合成されます。           (14) (7)の工程と同様に、T7 RNA polymeraseによる転写反応で、1本鎖のアンチセンスRNAが合成されます。           (15) 合成されたアンチセンスRNAを鋳型にして、(7)および(8)～(14)のサイクルを繰り返し、アンチセンスRNAが大量に増幅されます。                       ページの一番上へ