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| Fig.1 RNAlater保存組織からのRNA抽出(マウス肝・骨・腸) |
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Lane 1: Liver(day 0), Lane 2: Liver(day 6), Lane 3: Liver(day 19) |
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Lane 4: Bone(day 0), Lane 5: Bone(day 6), Lane 6: Bone(day 19) |
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Lane 7: Intestine(day 0), Lane 8: Intestine(day 6), Lane 9: Intestine(day 19) |
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組織は、RNA laterを用いて冷蔵一昼夜浸漬後、-20℃に保存。 |
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各保存日(day0, 6, 19)後にULTRASPECTM RNAを用いてtotal RNA抽出。 |
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| Fig.2 RNAlater保存組織の凍結融解の影響(マウス肝・骨・腸管) |
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Lane 1: Liver(day 0), Lane 2: Liver(day 6), Lane 3: Liver(day 19) |
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Lane 4: Bone(day 0), Lane 5: Bone(day 6), Lane 6: Bone(day 19) |
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Lane 7: Intestine(day 0), Lane 8: Intestine(day 6), Lane 9: Intestine(day 19) |
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組織は、RNA laterを用いて冷蔵一昼夜浸漬後、-20℃に保存した。 |
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Day 0, day 6に同一保存組織の一部を切り取りRNA抽出を行い残りの組織は再度-20℃に保存した。 |
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まとめ |
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| 肝臓: |
組織の凍結融解に関係なく約3週間(-20℃保存)RNAの分解は認められなかった(Fig. 1, 2)。 |
| 骨: |
RNA later保存day 19で分解が認められた(Fig. 1, lane 6)。保存組織の大きさや結合組織の持ち込み量の違いによる RNA laterの浸透速度差に起因した結果と推察された。高純度のRNAを骨から得るには、RNAlater保存後1週間以内にRNA抽出を行う事が望ましい。 |
| 腸管: |
他の組織と比較してRNAlater中でもRNAの分解が速く 進行するため、RNA later処理後速やかにRNA抽出を行う 必要がある。 |
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| Table1 各組織のRNA later保存における total RNAの収量及び純度変化 |
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| 上段:組織1mg当たりの収量 下段:OD 260/280 |
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| Fig.3 マウス組織からのRNA精製 |
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Lane 1: 胃, Lane 2: 腎臓, Lane 3: 肝臓, Lane 4: 骨, Lane 5: 腸管 |
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ULTRASPECTM RNAで精製したト-タルRNAを未変性アガロ-スゲルで電気泳動した。各種サンプルから抽出したト-タルRNA 1μgを各レ-ンにアプライした。 |
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